BioF系列高通量植物生物反應器是在傳統植物組織培養技術(shù)基礎上,設計制作的實(shí)驗設備系統,參照自然界植物生長(cháng)條件,采用間歇浸沒(méi)培養模式設計,利用液體培養基與植物組織間歇接觸提供培養基養分并及時(shí)補充CO?的高效率培養方式。
產(chǎn)品結構組成
● 植物生物反應器由反應器罐體、串聯(lián)部件、換氣和動(dòng)力控制裝置等組成
● 通過(guò)培養罐體的串/并聯(lián),進(jìn)一步提高植物生物反應器的高通量特征
● 采用整體化一思想,大大降低了生產(chǎn)風(fēng)險,設計人性化,操作簡(jiǎn)方便
BioF產(chǎn)品配置
● 型號:BioF系列:BioF IV型和BioF IV Plus型
● 硬件配置:可編程控制器(PLC)+彩色觸摸屏(HMI)+閥門(mén)+流量傳感器
● 軟件配置:HMI專(zhuān)用開(kāi)發(fā)軟件,定制系統,密碼保護;自動(dòng)操作界面監控界面等
● 系統功能:PLC控制氣泵;流量傳感器監控;界面顯示;浸沒(méi)和間隔時(shí)間可控可調
工作原理
新型植物生物反應器的工作循環(huán)分為四個(gè)階段:
第一階段:間歇階段培養體不與培養液接觸;
第二階段:在外力作用下,培養液開(kāi)始進(jìn)入植物組織培養室;
第三階段:培養基完全與植物組織接觸進(jìn)入漫沒(méi)培養階段,并保持浸沒(méi)狀態(tài);
第四階段:浸沒(méi)培養結束,在重力及外力作用下,培養液與植物組織分離,又進(jìn)入到可歌階段,完成一次循環(huán)。
BioF應用特點(diǎn)
● 種苗發(fā)育生長(cháng)快,節省培養時(shí)間1/3以上
● 能培養細胞團、植物組織、原球莖和毛狀根等器官
● 無(wú)需轉接/極少轉接或,節省人工1/2以上
● 延時(shí)培養直接發(fā)育成塊莖、鱗莖,組培苗提前上市
● 苗大茁壯,同步練苗和益生菌處理,移栽成活率高
● 實(shí)現微生物與植物組織共培養,提高天然產(chǎn)物得率
BioF產(chǎn)品優(yōu)勢
● 高通量:在同一反應器罐體中可培養數十株甚至數百株種苗,相對于組培瓶培養數量顯著(zhù)提高
● 高效率:通過(guò)培養基的及時(shí)交換和氣體交換,保證養分和CO?供應,提高生長(cháng)效率
● 簡(jiǎn)流程:無(wú)需多次轉接即可實(shí)現整個(gè)生活史的培養或較長(cháng)時(shí)間培養,而不影響組織發(fā)育或植株生長(cháng)
● 多應用:廣泛應用于植物脫毒、種苗擴繁、育種研究、生物制劑生產(chǎn)、種質(zhì)資源保存、遺傳轉化等方面
● 高品質(zhì):間歇的浸沒(méi)培養,減少了玻璃化現象,獲得的幼苗和體細胞胚質(zhì)量高,移栽成活率高
● 降成本:節省大量物料,簡(jiǎn)化接種過(guò)程的簡(jiǎn)化、自動(dòng)化程度的提高,減少人力成本
應用方向
BioF在農業(yè)生產(chǎn)與科研中的應用
培養對象 | 培養條件 | 培養產(chǎn)物 |
- 植物細胞(如胚狀體) - 植物組織(如愈傷組織) - 植物器官(如毛狀根) - 整株植物(如種苗) | - 植物生物反應器 - 液體培養基 - 適應的光照 - 氣體交換 | - 植物組織 - 代謝產(chǎn)物 - 植物細胞 - 職務(wù)種苗 |
主要培養目標
● 繁育經(jīng)濟作物和藥用植物種苗:草莓、魔芋、香蕉、藥用植物、花卉等
● 選育耐鹽堿、耐旱抗病品種:突變體篩選和單株后代的群體增殖與評價(jià)
● 植物組織細胞和器官的大規模培養:原球莖、鱗莖、微型著(zhù)、人工種子
● 練苗和種苗的群體免疫:培養后期益生菌和接抗菌集中處理無(wú)菌組培苗
● 共培養和互作研究:反應器隔絕環(huán)境中接種多種微生物確定其互作關(guān)系
● 細胞工廠(chǎng)和產(chǎn)物制備:通過(guò)脅迫和共培養實(shí)現活性產(chǎn)物高水平穩定表達
應用于種苗生產(chǎn)
大規模繁育種苗
● 替代傳統組培瓶:形成大苗,成品苗比常規組織培養大、質(zhì)量均一
● 節省大量的人工:基本上一次成苗,減少轉接次數,顯著(zhù)減少固廢
● 控制根冠比,培養壯苗:不同發(fā)育階段控制浸沒(méi)頻率和時(shí)間來(lái)實(shí)現
● 便于后續處理及技術(shù)整合:接種益生菌、直接完成練苗、不用清洗
● 培養木本植物的優(yōu)勢:克服褐變和抑制現象,持續生長(cháng)或直接扦插
白及組培過(guò)程
培養出莖和假鱗莖等繁殖體
在生物反應器中補充養分和延時(shí)培養,可以進(jìn)一步獲得塊莖等繁殖體,縮短組培苗田間生長(cháng)時(shí)間一年左右。
通過(guò)生物反應器培養直接產(chǎn)生的半夏離體塊莖、白及假鱗莖和百合鱗莖
培養原球莖等無(wú)菌繁殖器官
在植物生物反應器中培養石斛屬植物(如金釵石斛、鐵皮石斛等)原球莖,能夠獲得發(fā)育均一高產(chǎn)的原球莖材料,可長(cháng)期保持無(wú)極限生長(cháng),培養過(guò)程中直接表達石斛堿等生物活性物質(zhì),也可研究基因簇和基因表達模型;還可以與內生真菌共培養和協(xié)同產(chǎn)物表達,并用于保持和恢復內藥用植物生真菌產(chǎn)目標產(chǎn)物的能力。
金釵石斛原球莖:可以表達石斛堿,也可以誘導發(fā)育成石斛苗
培養藥用植物毛狀根和制備產(chǎn)物
植物毛狀根是植物組織(器官、細胞)受到發(fā)根農桿菌(A.rhizogenes)侵染所產(chǎn)發(fā)狀根,具有無(wú)極限生長(cháng)特點(diǎn);在植物生物反應器中大量培養毛狀根可以通過(guò)脅迫培養高水平產(chǎn)目標產(chǎn)物,無(wú)需添加植物激素,可直接用于生產(chǎn),周期短,質(zhì)量穩定可控,或用于研究產(chǎn)物表達模型。
紫草毛狀根:可以生產(chǎn)藥品、化妝品和食品添加劑
應用于種質(zhì)資源挖掘與培育
● 繁育和保護:收集和快速備份珍稀名貴種質(zhì)資源
● 高通量耐鹽抗逆品種:優(yōu)良種質(zhì)資源評價(jià)與篩選
● 育種平臺:互作關(guān)系評價(jià),細胞和組織培養技術(shù)
應用于品種高通量篩選
BioF高通量植物生物反應器尤其是適合開(kāi)展植物耐鹽、耐旱品種篩選,與常規組培瓶和小區試驗比較,1)鹽濃度持續可調;2)水分(浸沒(méi)頻率)連續可調;3)提高篩選效率100倍以上。
半夏耐鹽品系篩選過(guò)程及培養效果(左:常規品系,右:新品系)
應用于扦插、嫁接育苗和資源保護
● BioF植物生物反應不僅可以在無(wú)菌組織培養中使用。也可以用于有菌繁殖體的直接培養,如扦插、嫁接、資源采集和保護性繁育
● 扦插育苗:木本物種直接扦插,促生根,催芽和繁殖,無(wú)需經(jīng)過(guò)無(wú)菌培養,有效避免有益內生菌的丟失
● 嫁接育苗:形成大量高質(zhì)量均一的接穗,采集和嫁接不受季節限制,如配合蔬菜瓜果種苗的標準化生產(chǎn)
● 種質(zhì)資源保護:珍稀瀕危資源繁育與實(shí)時(shí)保護,就地采集扦插和方便攜帶,同時(shí)保障內生菌和伴生微生物
在BioF植物生物反應器直接打插茶苗和沉香的培養效果,攜帶方便的反應器罐體處理保存量大,攜帶方便,便于及時(shí)觀(guān)察,及時(shí)處理。
應用于可控條件授粉和全生活史研究
● BioF植物生物反應器具備生長(cháng)空間、培養時(shí)長(cháng)和養分補充等優(yōu)勢
在BioF植物生物反應器通過(guò)足夠養分,促進(jìn)石斛開(kāi)花和實(shí)現人工授粉;充分培養后也獲得足夠量的石斛鮮條
應用于植物/微生物共培養系統
● 通過(guò)控制培養條件,實(shí)現植物組織(器官)與植物內生菌等微生物共培養,發(fā)揮內生菌產(chǎn)生抗腫瘤藥物等生物活性物質(zhì)的能力,實(shí)現產(chǎn)物的高水平穩定表達。
● 可應用于植物活體保存內生真菌,無(wú)需連續轉接,并維持其產(chǎn)物表達能力。
在BioF植物生物反應器中實(shí)現石斛原球莖與多種或一種內生真菌的共培養,設置培養條件可以實(shí)現多種培養模式和培養效果。
應用于組培苗群體免疫和高效率篩選菌肥優(yōu)勢菌群
● 培養成苗后,可以直接在反應器中均勻實(shí)現益生菌/拮抗菌的接種,實(shí)現種苗群體免疫,有效預防田間病害的發(fā)生危害。
● 通過(guò)控制培養條件,可以多菌株與目的植物的共培養,實(shí)現同步競爭和定殖能力比較,以及開(kāi)展致病性測定。
● 從共培養植株中重新分離測試菌株,測試其豐度和定值特征,能夠有效避免菌肥試驗中土壤和環(huán)境微生物干擾。
在BioF植物生物反應器中加入菌培養液處理12hr,實(shí)現白及益生菌和石斛內生菌的均一接種,其中,石斛內生菌可以培養保存5個(gè)月以上,并保持高水平表達石斛堿托潛力。
應用于基礎研究
應用于植物組織和干細胞培養
● 在植物生物反應器中能夠大量培養植物愈傷組織,分析和測定愈傷組織(細胞團)中生物活性組分的產(chǎn)生條件,拓展植物組織培養的研究深度和廣度。
● 大量培養細胞、組織和器官,不僅實(shí)現陽(yáng)光房和盆栽實(shí)驗資源,還能保證研究過(guò)程標準化、智控化,建立目標活性產(chǎn)物的表達模型。
● 間歇浸沒(méi)條件下培養大量愈傷組織細胞或干細胞,通過(guò)酶處理和分離,容易制備大量原生質(zhì)體,并開(kāi)展后續演技和培養,如誘導發(fā)育為體細胞胚等繁殖體。
在BioF植物生物反應器中實(shí)現石斛原球莖與多種或一種內生真菌的共培養設置培養條件可以實(shí)現多種培養模式和培養效果。
應用于植物組織和植株對其它處理技術(shù)的響應
生物反應器培養模式更有利于研究光、電、熱、磁、波等物理效益對植物生長(cháng)的影響,甚至對難培養植物具備誘導發(fā)育的效果。
在BioF生物反應器生物反應器中測試太赫茲波(能量環(huán))能對半夏有顯著(zhù)促生長(cháng)作用,并在種子(珠芽等)繼代培養中有持續影響。
研究效應物對植物生長(cháng)的影響
● BioF植物生物反應器有利于實(shí)現多組甚是數十個(gè)處理的生物學(xué)平行試驗,跟蹤研究培養過(guò)程的養分消耗和發(fā)育模型。
● 有利于通過(guò)養分和效應物脅迫條件對植物發(fā)育的影響模型,這些效應物如金屬離子和生物因素等,目標包括產(chǎn)物表達和花期控制等。
● BioF生物反應器中平行研究硒等效應成分的吸收、轉運和轉化模型,實(shí)現SOD協(xié)調表達水平的標定。研究半夏(魔芋等天南星科植物)倒苗和養分向珠芽等繁殖體轉移的條件模型,服務(wù)于生殖研究。
● BioF生物反應器培養金釵石斛組培苗的過(guò)程(a-j)各間隔15d)
● BioF生物反應器培養金釵石斛時(shí)不同漫沒(méi)頻率對苗生長(cháng)的影響
● 不同濃度MeJA處理對反應器培養金釵石斜生長(cháng)的促生/抑制影響
● 不同濃度的MeJA脅迫處理對促進(jìn)生物反應器中半夏倒苗的效果
應用推廣單位
● 海南大學(xué):香蕉、沉香、蘭花、油茶
● 浙江理工大學(xué):楊樹(shù)、半夏、芋頭、番茄、石斛、三葉木通
● 云南省農業(yè)科學(xué)院:萬(wàn)壽菊、茶葉、百合
● 遵義醫科大學(xué):鐵皮石斛、金釵石斛、茶葉、半夏
● 福建農林大學(xué):金線(xiàn)蓮、三角梅蘭花
● 長(cháng)春大學(xué):多肉植物、亞麻
● 南京工業(yè)大學(xué):白及、藏紅花、半夏、紅豆杉
● 西南民族大學(xué):七葉一枝花、半夏
● 大連民族大學(xué):櫻桃、草莓
● 江蘇師范大學(xué):紅豆杉、半夏
● 河南農業(yè)大學(xué):山藥
● 湖南工業(yè)大學(xué):黃精、百合
● 九江學(xué)院:香蕉、沉香
● 三峽集團長(cháng)江珍稀植物研究所:蛇足石杉和蕨類(lèi)花卉
● 亳州城建發(fā)展控股集團有限公司:半夏
已經(jīng)培養過(guò)的部分種苗
● 部分已由本科研團隊建成的生物反應器種苗繁殖體系包括:金線(xiàn)蓮、鐵皮石斛、金釵石斛石斛、白及、半夏、芋頭、紅掌、浙貝母、藏紅花、香蕉、鵝掌楸、黑枸杞、梔子、櫻桃、茶葉、百合、草莓等;
● 部分已由用戶(hù)建成的生物反應器種苗培養和互作關(guān)系體系包括:蘭花、水稻、黑小麥、油茶、蝴蝶蘭、三角梅、沉香、黃精、馬鈴薯、山藥、萬(wàn)壽菊、菊花、亞麻、五加皮、楊樹(shù)、蛇足石杉、三葉木通、七葉一枝花、串葉松香草等。
已經(jīng)建成植物生物反應器示范平臺
通過(guò)植物生物反應器平臺技術(shù)和特殊種質(zhì)挖掘能力的建設,科研團隊發(fā)起和支撐了多家學(xué)科和研發(fā)平臺的建成和效益。其中包括:天然藥物功能?chē)?地方聯(lián)合工程中心、江蘇海洋產(chǎn)業(yè)研究院、鹽城市近海生物資源工程中心、江蘇秸稈和涂生物資源利用省級工程中心、遵義醫科大學(xué)生物資源健康利用研究中心、貴州省藥用蘭科植物開(kāi)發(fā)利用工程中心和浙江省有害生物預防控制工程中心等平臺。