馬鈴薯是重要的糧食作物,但病蟲(chóng)害造成全球減產(chǎn)約17 %。馬鈴薯晚疫病是由病原微生物致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的,在19世紀40年代引發(fā)了愛(ài)爾蘭饑荒,至今仍是對全球馬鈴薯生產(chǎn)危害最大的病害。植物免疫取決于細胞表面模式識別受體(PRR)和細胞內免疫受體的病原體識別,許多抗致病疫霉的R基因(Rpi基因)均是從馬鈴薯的野生近源物種中克隆。
近日,中國科學(xué)院微生物研究所林嘯研究團隊、英國塞恩斯伯里實(shí)驗室Jonathan D.G. Jones團隊、中國農科院農業(yè)基因組研究所黃三文團隊和韓國首爾大學(xué)Kee Hoon Sohn團隊合作,在Nature Genetics在線(xiàn)發(fā)表題為 “Solanum americanumgenome-assisted discovery of immune receptors that detect potato late blight pathogen effectors” 的研究論文。該研究發(fā)布了四種光果龍葵(Solanum americanum)種質(zhì)的高質(zhì)量參考基因組,建立了光果龍葵-致病疫霉的效應物觸發(fā)免疫(ETI)互作全局圖,并成功克隆到3個(gè)新的馬鈴薯晚疫病免疫受體及其對應的效應子。野生茄科植物光果龍葵(Solanum americanum)是馬鈴薯和番茄的近源物種,大多數種質(zhì)對疫病具有優(yōu)良抗性,該研究團隊發(fā)現光果龍葵是馬鈴薯晚疫病良好的抗病基因來(lái)源。利用三代測序技術(shù)對4種具有抗晚疫病變異性的光果龍葵種質(zhì)SP1102,SP2271,SP2273和SP2275進(jìn)行高質(zhì)量基因組組裝和注釋。為了研究光果龍葵基因組的進(jìn)化,對來(lái)自15個(gè)基因組的代表性蛋白質(zhì)序列聚類(lèi)。物種進(jìn)化樹(shù)表明,光果龍葵是馬鈴薯和番茄共同祖先的姐妹物種,并且在大約1410萬(wàn)年前分化出,且染色體重排(CR)是一個(gè)重要的進(jìn)化過(guò)程。此外發(fā)現光果龍葵基因組之間染色體結構變異(SV)是引起和維持表型多樣性的重要原因(圖1)。研究團隊構建SP1102的NLR蛋白的系統進(jìn)化樹(shù)分析,基因表達熱圖,基因組物理圖譜,發(fā)現71 %的NLR基因成簇分布,多個(gè)已知的NLR基因相對高表達,該團隊手動(dòng)注釋了SP1102,SP2271和SP2273基因組的NLR基因(圖2)。此外構建了20個(gè)材料的NLR泛基因組,表明此研究中的種質(zhì)代表了光果龍葵NLR庫。對3種材料NLR基因注釋和NLR泛基因組對研究NLR基因進(jìn)化和其他茄科植物ETI的功能研究具有重要作用。對52份光果龍葵材料進(jìn)行重測序,52種種質(zhì)可分為四組,該團隊還利用效應子組學(xué)(Effectoromics)篩選技術(shù),完成了52份光果龍葵材料與315個(gè)致病疫霉RXLR類(lèi)效應子的ETI互作全局圖(圖3)。最后利用全基因組關(guān)聯(lián)分析,BSA測序和抗病基因富集測序等方法,成功克隆了三個(gè)效應子的免疫受體Rpi-amr4,R02860和R04373。并利用CRISPR/Cas9基因編輯獲得敲除株系和煙草中異源表達進(jìn)行抗病基因功能驗證(圖4)。此研究提供了有價(jià)值的基因組和遺傳學(xué)工具,可促進(jìn)對馬鈴薯晚疫病和其他植物病害的了解和培育抗病品種。圖4 識別PITG_22825的Rpi-amr4的鑒定與表征—— 參考文獻 ——
Lin, X., Jia, Y., Heal, R., et al. Solanum americanum genome-assisted discovery of immune receptors that detect potato late blight pathogen effectors[J]. Nature Genetics, 55, 1579-1588 (2023).
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