軟件：OriginPro9.1

素材：PAM熒光儀導出的PAR和ETR數據。

操作步驟

1，正確安裝Origin軟件，打開(kāi)軟件

2，打開(kāi)正確操作PAM測量得到的快速光曲線(xiàn)數據文件

3，將PAR和ETR的數據復制到Origin軟件，并編輯橫坐標和縱坐標注釋及單位

4，選中數據，生成散點(diǎn)圖，注意：一定一定一定要先選中數據，才能生成圖哦！

5，可以根據需求調整散點(diǎn)圖橫縱坐標起始值，及最大值，間隔大小以及散點(diǎn)的樣式，形狀或顏色。

6，開(kāi)始擬合：激活Graph，選中散點(diǎn)圖的數據點(diǎn)。

注意：一定一定一定要先選中散點(diǎn)圖中的點(diǎn)，再點(diǎn)擊工具欄！

點(diǎn)擊軟件上方的 Analysis→Fitting→NonLinearCurve Fit→Open Dialog

7，創(chuàng )建擬合方程

對話(huà)框中，Category選項選擇“UserDefined”（用戶(hù)自定義），再點(diǎn)擊箭頭所指按鈕，打開(kāi)創(chuàng )建新方程的對話(huà)框。對話(huà)框中：Function Name一欄可對方程進(jìn)行命名（僅限英文），此次命名為“LightCurveFit”；FunctionType一欄選擇第二個(gè)“Equations”，然后點(diǎn)擊next進(jìn)行下一步。

8，編輯擬合方程

進(jìn)入參數設置，第一行和第二行為自變量x和因變量y，第三行為你自己需要設置的方程參數，以一元二次方程為例，設置參數a,b,c（字母和標點(diǎn)符號必須是英文輸入法），然后點(diǎn)擊next進(jìn)行下一步。

9，設置方程式

進(jìn)入方程輸入，如圖，在紅線(xiàn)框出的地方輸入一元二次方程。（字母和符號必須是英文輸入法）。

y=x/(a*x^2+b*x+c)

到此處基本設置已完畢，一直點(diǎn)擊next即可，最后點(diǎn)擊finish！

10，開(kāi)始擬合

點(diǎn)擊并切換至Parameters窗口，點(diǎn)擊Simplex擬合，直至Parameters內參數不變，點(diǎn)擊Fit完成擬合。

點(diǎn)擊完Fit，可能會(huì )出現一個(gè)對話(huà)框，詢(xún)問(wèn)是否切換到CurveFit Report Sheet。

11，查看擬合結果，修改擬合曲線(xiàn)注釋文本等

強烈建議：

分析結束后請盡快通過(guò)File→Save Project保存工作流程。

擬合曲線(xiàn)可以通過(guò)File→Export Graph導出。

12，計算快速光曲線(xiàn)參數

測量光響應曲線(xiàn)時(shí)<Light Curve>程序連續照射幾個(gè)強度逐漸升高的光化光，一般情況下每個(gè)梯度的光化光持續時(shí)間太短而不足以使光合作用達到穩態(tài)。因此，此時(shí)的光響應曲線(xiàn)被稱(chēng)為快速光曲線(xiàn)（RLC）。和傳統的光響應曲線(xiàn)不同，快速光曲線(xiàn)反映了當前狀態(tài)下光合作用的信息。通過(guò)對快速光曲線(xiàn)進(jìn)行擬合，可以得到以下幾個(gè)主要參數：

? α，單位：electrons/photons，快速光曲線(xiàn)的初始斜率，反映了光能利用效率。

? ETRm，單位：μmol· m-2 · s-1，最大電子傳遞速率。

? Ek，單位：μmol· m-2 · s-1，最小飽和光強（半飽和光強），反映了樣品對強光的耐受能力。

PamWin-3采用Eilers and Peeters（1988）的公式對快速光曲線(xiàn)進(jìn)行擬合，擬合公式如下：

各個(gè)參數的計算公式分別是：

以上Origin9.1進(jìn)行PAM熒光儀快速光曲線(xiàn)擬合操作指南請參考！如有其他技術(shù)問(wèn)題，請聯(lián)系上海澤泉科技股份有限公司！